王晓英，王家军，朱根军

(1.宝应县水产技术指导站，江苏 宝应 225800；2.宝应县氾水镇农业农村局，江苏 宝应 225819)

近几年宝应县不少养殖户引进加州鲈进行池塘养殖，虽然引进加州鲈养殖时间不长，但因放养密度较高等多种原因，加州鲈养殖过程中病害的种类越来越多，而病毒造成的危害更加不容忽视。笔者分享一例加州鲈虹彩病毒病害的诊治与防控过程，希望加州鲈养殖户能够借鉴。

一、养殖塘口及管理

加州鲈养殖发病塘口位于宝应县氾水镇，面积38 亩，平均水深1.9 米，水源良好。池内配备叶轮式增氧机 6 台(3 千瓦 2 台、1.5 千瓦 4 台)。2021 年4 月17 日由浙江省购进12 万尾加州鲈苗种，平均规格11.9 克/尾，在池塘边用网围出约2.5 亩水面进行驯养，每天投喂4 次2#加州鲈专用饲料(蛋白质水平50%)，28天后放入大池中，投放量3 000 尾/亩(剩余鱼种放入面积为5 亩的另外1 只池塘)；套放异育银鲫200 尾/亩、白鲢20 尾/亩、花鲢45 尾/亩。随着加州鲈生长，适时改投3#、4#加州鲈专用颗粒饲料(蛋白质水平48%～49%)，每天投喂调整为3 次。每间隔3～5 天加注新水1次；晴好天气下，每天凌晨及中午各开增氧机1次、累计时间在6小时以上，阴雨天根据情况适时开机；每7～10 天交替泼洒复合微生态制剂、复合有机酸，抛撒10%过硫酸氢钾复合盐片剂；7月下旬以后，每4～5天使用“复合芽孢杆菌”等微生态制剂改良水质，养殖过程中水质良好。

二、加州鲈发病及诊断

6 月下旬至7 月初，养殖户发现少量鱼体表溃疡，镜检鳃丝有车轮虫、指环虫寄生，使用2%复合碘250 毫升＋硫酸铜70 克＋中草药“出血烂鳃康”300 毫升/(亩·米)，化水全池泼洒1 次，“烂身”症状有所改善。7月10日发现部分鲈鱼沿池边缓慢游动，次日有少量死亡，每天死亡30～40 尾，随后死亡量逐渐增加，1 周后每天死亡量500～600 尾。7 月20 日笔者到塘口检查，水体溶氧在5 毫克/升以上，水质快速检测仪现场测定，NH4＋-N 为 1.25 毫克/升，NO2--N 为 0.1 毫克/升；现场检查发病鱼体表溃疡面、鳃丝病变，有烂鳃症状(图1、图2)；解剖发现内脏脂肪块堆积、肠道表面被脂肪覆盖、肠内空无食物(图3)；肝脏有点状出血、花肝，部分有腹水(图4)。实验室检测虹彩病毒及肿大细胞病毒，并进行细菌分离培养。参考夏理海等(2016)的方法，设计并合成用于鉴定虹彩病毒科蛙病毒和肿大细胞病毒的特异性PCR引物，在无菌条件下解剖发病加州鲈，取其肝、脾、肾、鳃组织，各加入200 微升5%Chelex-100悬浊液和20微升蛋白酶K，混匀10秒、56℃水浴20 分钟、99℃水浴 8 分钟、4℃环境下12 000 转/分离心4 分钟，上清液即为待测样品DNA。其扩增程序为95℃预变性3 分钟、95℃变性30 秒、55℃退火 30 秒、72℃延伸 30 秒，共进行35 个循环，最后在72℃继续延伸10 分钟，4℃保存。PCR 扩增完成后，取6 微升PCR 扩增产物使用1%的琼脂糖凝胶电泳检测。凝胶电泳发现蛙病毒目标条带，未见肿大细胞病毒目标条带；同时参考柯文杰等(2020)方法进行细菌分离培养，结果表明感染细菌主要是嗜水气单胞菌。

图1 病鱼外观

图2 鳃丝病变

图3 肠道脂肪覆盖，无食物

图4 腹部肿大

三、药物使用及效果

根据实验室检测结果判断，加州鲈感染虹彩病毒兼有嗜水气单胞菌引起的细菌性病害。据此情况，在确保养殖水体环境稳定、鱼体免疫力增强的前提下，重点用药物治疗细菌病害。具体用药方案如下：7 月21 日上午，使用“免疫多糖”110 克＋7%VC粉 250 克/(亩·米)化水全池泼洒；23 日上午，使用8%一元二氧化氯片剂120～200 克/(亩·米)全池抛撒，傍晚使用2%复合碘250 毫升/(亩·米)化水全池泼洒，当晚全池抛撒“颗粒氧”片剂220克/(亩·米)，24日上述制剂及用量重复使用1 次；7 月26 日，使用“免疫多糖”110 克＋7%VC粉 250 克/(亩·米)化水全池泼洒1次，外用的同时，拌饵内服10%氟苯尼考粉＋10%盐酸多西环素糖粉＋胆汁酸＋多维＋维生素K3(用量参照商品包装使用说明)，每天傍晚投喂1 次，连喂7 天。7 月26 日鱼的死亡数量下降到300 尾左右，随着25－29 日宝应地区降雨及降温过程，每天死亡量逐渐下降到30～40 尾；至8 月中下旬，每天虽仍有10 尾左右死亡量，但总体上病情得到了有效控制。

四、讨论与分析

加州鲈自引进以来，随着养殖密度增加、水体环境恶化以及病原微生物的传播扩散，病害越来越多，而病毒病的发生越来越频繁且造成的损失越来越大。据文献资料，能够自然感染引发加州鲈成鱼死亡的病毒病多为虹彩病毒科蛙病毒、细胞肿大病毒等种类，偶有加州鲈感染弹状病毒及神经坏死病毒的情况发生。由于养殖塘口发病大量死鱼时的环境温度(30℃左右)是该病发生的理想温度，且病死鱼(体表有斑块状出血性溃疡，烂鳃，肝脏点状出血、花肝等)疑是加州鲈虹彩病毒病症，因此对发病加州鲈进行了蛙病毒及细胞肿大病毒的检测。

虹彩病毒科蛙病毒属引发病害时，可以导致加州鲈大面积发病死亡，也可以是不表现症状的隐性带毒，对该病的诊断必须综合流行情况、症状、剖检、病毒分离鉴定等进行判定(王庆等，201l)。9月1日，笔者从病害基本得到控制的养殖塘口，随机抽取2尾活动正常、未表现发病症状的加州鲈，采用PCR方法进行检测，发现蛙病毒属的虹彩病毒仍然是阳性，与发病大量死亡时相比，仅仅病毒检出的部位有差异。因此饲养密度过大、溶氧降低或水体环境的剧烈变化等可能是导致该病暴发死亡的诱因，合理的养殖模式以及科学的管理方式才是预防该病最好的措施。

鱼类病毒病防治过程中忌乱用药，用药不当极易引起鱼体应激反应而增加死亡。此次防控过程中养殖户甘愿冒险用药并取得较好的效果，主要是使用了针对细菌性疾病的药物品种，对水体消毒、杀灭病原起到了很好的作用，而池塘水体泼洒免疫多糖及VC粉、颗粒氧片剂等，降低了鱼的应激反应，增加了水体溶氧；内服药物的同时添加胆汁酸、多维等品种起到了调理鱼体的作用。当然，此次药物使用后刚好有一次降雨降温过程，效果是否偶然，有待进一步分析研究。