一例鲤、鲫暴发性出血病的诊治
一例鲤、鲫暴发性出血病的诊治
刘家星,陈霞,陈健,欧阳萍,陶丽竹,李良玉,魏文燕,杨马,唐洪,张小丽
(1.成都市农林科学院,四川 成都 611130;2.四川农业大学鱼病研究中心,四川 成都 611130)
一、基本情况
1.养殖情况
本次发病区域位于成都市新津区集中连片养殖池塘,发病池塘主要养殖品种为鲤、鲫,养殖池塘水域面积大小不一,集中连片区域池塘总面积1 000余亩。本次选取发病较为严重的1个养殖户池塘,兼顾周边养殖场。该养殖户的养殖池塘面积为40亩,水源为自然降水、地下水以及湿地沉降水。通过现场观察,池塘水体较为清澈,无漂浮物,在饵料台附近可见少许漂浮油膜,水面散在性漂浮病死鱼;增氧机处于常开状态。
2.水质检测
水质检测时间为14时左右,使用采水器取水面下15厘米水体。池塘水温10.3℃、溶氧8.8毫克/升、pH 8.04、氨氮1.2毫克/升、亚硝酸盐0.05毫克/升,氨氮和亚硝酸盐含量偏高。
3.发病情况
该养殖区域从2021年12月起陆续出现发病情况,最初以鲤鱼为主,后期扩散至鲫鱼养殖池塘。根据部分养殖户反馈,最早发现的病例在成都市蒲江县流水养殖池塘。据了解,本区域内养殖鲤、鲫苗种均购自蒲江一带苗种繁育场,草鱼购自广东一带苗种繁育场。
该养殖户主要养殖品种为鲤、鲫,搭配鲢、鳙和草鱼。鲤、鲫均为当年苗种,购自蒲江一带苗种繁育场,放养大规格苗种5 000尾/亩。2022年1月底该养殖户进行了1次拉网捕鱼,拉网后池塘未进行消毒和采取其他措施。2月初池鱼开始发病,初期每天死亡几尾,后期发展至10~15千克,发病最高期日死亡量达150千克左右。发病个体大小不一,死亡个体鲤均重在600克左右、鲫在400克左右,发病趋势呈现出典型的“急、快、广、高”。在进出水口附近可观察到病死鱼沉在池底,部分浅水区域可见病鱼在池底呆滞不动或漂浮于水体中,对惊吓不敏感。
二、解剖学观察
选取典型发病鲤、鲫进行观察,鲤体表多见散在充血、出血(图1a),鳃盖前段出现1个较大创口,边缘溃疡发白,鳃盖充血、出血(图1b),鳍条及基部充血、出血(图1c),腹部可见大范围充血、出血(图1d),肛门红肿,鳞基部充血、出血、松动易落,有竖鳞现象(图1e),鳃丝严重充血(图1f),血液凝固性变差,易溶血;鲫的口部周围严重充血、出血,并伴有吻部溃烂(图1g),鳃盖周边可见散在分布溃疡灶,体表偶见充血、出血点位,鳃丝严重充血(图1h),鳞松动易落。
现场剖解,鲤未见腹水,精巢发育约Ⅲ期,未见出血点(图1i),腹膜上有散在出血点,肾脏肿大、易碎,脾脏肿大、发黑、质地较脆,胆囊充盈呈墨绿色,肝脏肿大、易碎、有典型的放射形丝状样(花斑),肠道未见食物、黏液较多、内壁有散在出血点;鲫卵巢发育约为Ⅳ期,卵巢膜明显充血,鳔上可见散在出血点,肾脏肿大、易碎,脾脏肿大、发黑,质地较脆,胆囊充盈呈墨绿色,肝脏肿大、易碎,肠道未见食物、黏液较多,内壁有散在充血、出血点。
图1 患病鲤、鲫典型病变
三、病原学检测及结果
1.寄生虫
制作病鱼体表黏液涂片、鳃丝压片、肠黏液涂片、肠黏膜刮片以及血液涂片,在显微镜下分别观察,均未发现寄生虫,排除寄生虫感染的可能性。
2.细菌
无菌操作下从病鱼肝、脾、肾取样接种BHI平板,培养后观察发现,在接种的平板上长出圆形、边缘光滑、中央凸起的黄白色优势菌落;对优势菌落进行革兰氏染色观察,结果显示分离所得的优势菌均为革兰氏阴性杆菌,且均为散在排列的短杆状菌体(图2);对细菌分离纯化,共得到3株菌株,分别编号为1S、2G和L2S。
图2 分离菌株革兰氏染色
对纯化后的菌株进行16S rRNA检测,测序结果在GenBank上进行Blast比对。结果发现,1S序列与温和气单胞菌(Aeromonas sobria)序列相似性达97.31%,2G序列和L2S序列与腐希瓦氏菌(Shewanella putrefaciens)序列相似性达97.91%和98.52%。对分离到的3个菌株进行药物敏感性试验结果见表1。
表1 分离菌株药物敏感性试验结果
3.病毒
根据病鱼的病变特征,进行鲤、鲫常见病毒病的PCR检测。电泳结果显示,空白对照无条带,阳性对照均有条带,被检测样品CEV、KHV、SVCV均无条带出现,判定为CEV、KHV、SVCV阴性。
四、治疗建议
1.尽快捕捞死鱼
死亡及濒死鱼要统一收集,待相关保险定损人员确定后实施无害化处理,减少进一步交叉传播的可能性。
2.减少日常投喂
根据发病情况减少日常投喂量,首先降低因过量采食对患病鱼造成的负担,其次降低未被摄入的饲料对水体造成影响的风险。
3.饵料中适当加入植物多糖制剂
拌料投喂黄芪多糖等,以增强鱼体的免疫力。不可使用高刺激性杀虫和消毒药物,不得随意使用抗生素等药物盲目治疗。
4.适时开增氧机
根据水体溶氧情况开增氧机,不需要全天开启,以开四周增氧机为宜。
5.内服外消
在条件允许的情况下,每天向池塘加注少量新鲜、干净的活水。外用含氯消毒剂全池泼洒,根据药敏试验,用氟苯尼考拌料投喂5~7天,使用剂量按照使用说明书。
五、讨论
暴发性出血病在鲤科鱼中较为常见,表现为体表多部位或体内多器官充血、出血。引起鲤、鲫出血病的病因有多种,较为常见的为病毒和细菌以及二者的混合感染。本例分离得到温和气单胞菌和腐败希瓦氏菌两种细菌,提示引起本次鲤、鲫暴发性出血病的病因为细菌感染,而非病毒感染所致。
腐败希瓦氏菌在水产品加工与贮藏相关领域报道较多,少有报道其作为病原菌感染鱼类。但有相关研究显示,腐败希瓦氏菌是一种人畜共患病原菌,可引起人类软组织感染、心膜炎等。温和气单胞菌是一种淡水养殖中的常见致病菌,该菌可引起鱼类出血病和溃疡病等,其危害程度与嗜水气单胞菌相当。
值得注意的是,本次调查区域发病前,在苗种购买地也出现过类似发病情况,不排除苗种携带病原的可能性。由于诱发水生动物疾病的因素由宿主、环境和病原共同决定,在调查过程中发现养殖池塘水体氨氮和亚硝酸盐含量偏高,加之发病期间气温变动频繁,这可能造成鱼处于应激状态,抵抗疾病能力下降,最终诱发疾病。
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