草鱼细菌性败血病防治一例
2021年7月15日,广东省信宜市一家养殖场草鱼发病,茂名市农业科技推广中心立即组织技术员抵达现场了解情况,并采集水样、鱼样进行检测。
一、池塘条件
发病鱼塘约5亩,东西走向,水深1.5米,单养草鱼,放养草鱼4 500尾(规格约500克/尾),主要投喂配合饲料和青饲料,每天2次。养殖池塘属于老塘,养殖前未进行清淤晒塘处理,池塘配置增氧机2台。
二、发病情况
据养殖户反映,7月11日将草鱼过塘,7月14日开始出现数十尾草鱼在塘边静止不动、对外界刺激不敏感,有的发生阵发性乱窜、乱游。
三、检测
1.水样检测
7月15日上午取水样进行检测,水体透明度21厘米、溶氧4.3毫克/升、pH 7.2、亚硝酸盐0.339毫克/升、氨氮0.35毫克/升。
2.病鱼检测
鱼体表黏液增多,上下颌、口腔、鳃盖、鳍条及鱼体两侧轻度充血,腹部稍膨大(图1)。解剖病鱼发现腹腔内有少量淡黄色透明腹水,肝肾肿大、色淡,肠内有少量食物(图2)。取病鱼患病部位体表黏液、鳃丝等显微镜检测,未发现寄生虫。
图1 病鱼外表
图2 病鱼解剖
3.细菌鉴定与药敏试验
(1)细菌分离、纯化。用70%的酒精消毒病鱼体表,断尾放血后解剖,用灼烧后冷却的接种环蘸取肝、肾、脾组织,分别接种至营养琼脂培养基上,倒置于28℃培养箱中培养24小时,长出优势菌落。菌落呈淡黄色、圆形、光滑、微凸形态。用接种环挑选单菌落,在培养基上进行3次重复单菌落划线。
(2)革兰氏染色。选取6株优势菌株进行革兰氏染色,结果显示6株细菌均为革兰氏阴性菌。镜检观察,6株菌体大都呈杆状,多数单个、个别双个排列。
(3)生理生化鉴定。取6株优势菌株(编号为1~6)进行生理生化鉴定,6株分离菌株均氧化酶阳性、接触酶阳性、精氨酸双水解酶阳性、赖氨酸脱羧酶阳性、鸟氨酸脱羧酶阴性、发酵葡萄糖产酸产气、不发酵肌醇、甘油产气、V.P.试验阳性、M.R.试验阴性、发酵阿拉伯糖、水杨甙阳性、半乳糖苷酶阳性、水解七叶灵。根据《伯杰氏细菌鉴定手册》(第9版),初步鉴定1~6号菌株为嗜水气单胞菌。
(4)PCR技术检测。取1~6号菌株进行PCR检测,结果显示6株菌株均为嗜水气单胞菌。
(5)药敏试验。采用恩诺沙星、氟苯尼考、庆大霉素、土霉素4种药物(每种药物两个重复求平均值)对各菌株进行药敏试验,测量其抑菌圈大小,结果见表1。菌株对庆大霉素、恩诺沙星、氟苯尼考极敏感,对土霉素敏感。
表1 药物对菌株的抑菌圈直径
四、诊断结果
根据调查、检测,诊断病鱼为感染嗜水气单胞菌引起的细菌性败血病。
五、病因分析
细菌性败血病流行时间为3-11月,高峰期常为5-9月,水温9~36℃均有流行,尤以水温持续在25℃以上时严重。拉网捕鱼、搬运过程中导致鱼体表皮机械损伤,从而为致病菌入侵提供机会。
发病鱼塘是多年老塘,养殖前未做好塘底清淤消毒工作,池塘底质老化、溶氧低、有害物质多,氨氮、亚硝酸盐明显高于正常标准,一方面给病原细菌的滋生提供了温床;另一方面鱼整天生活在此水体中,抵抗力下降,易引发疾病。
六、治疗过程
鱼类细菌性败血病最有效的治疗方法是采用外泼杀菌药和内服药饲相结合。7月16日,全池泼洒漂白粉1克/米3;17日用氟苯尼考拌饲投喂,每千克鱼体重使用20毫克(1次量),连用5天。用药1周内观察效果,基本控制了细菌性败血病的蔓延。
七、建议
1.清塘
养殖前清除塘底过多淤泥或排干池水后对池底进行翻晒。用生石灰清塘,干法清塘用量为60~75千克/亩,带水清塘用量为125~150千克/亩。清塘后7~10天药性消失,即可放入水产养殖动物。
2.苗种放养
鱼种下塘前,注射预防细菌性败血病的疫苗,用高锰酸钾15~20毫克/升药浴10~30分钟或4%的食盐水药浴5~20分钟;选择优质健壮鱼种,放养密度要合理,根据养殖技术水平及防病能力确定放养密度。
3.日常管理
在养殖过程中定期加换新水,一般每7~10天加水1次,每次加入新水20~30厘米;每20天换水1次,每次换水30%左右,换水应在晴天白天进行。发病季节每月用生石灰20~30克/米3全池遍洒1~2次,使池水的pH保持在8左右。
正确掌握投饲量,多投喂天然饲料及优质饲料,以提高鱼体抗病力。草鱼饲料主要有两种,一种是配合饲料,一种是青饲料,投喂应以配合饲料为主、青饲料为辅。每周食场周围泼洒漂白粉1~2次,消毒食场,用量视食场大小及水深而定,一般为250~500克。
在拉网前后要用漂白粉等含氯消毒剂消毒池塘水,减少鱼感染细菌的机会。当发现养殖鱼患病时切忌拉网,否则会加剧病鱼的死亡。
加强巡塘工作,定期抽取鱼样并进行检测,发现鱼病及时进行防治。在发病季节,定期杀灭寄生在鱼体外的寄生虫,防止寄生虫破坏鱼体表而受细菌入侵。发病鱼池用过的工具要进行消毒,病死鱼要及时捞出深埋,不能到处乱扔。病好后仍应继续做好防病工作,否则鱼还会再次感染发病。
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