一例黄颡鱼腹水症的诊治

唐 鹏 王 均 贺 扬 李 煜 唐 枭 蒲森婷 石桉宁

(内江师范学院，“长江上游鱼类资源保护与利用”四川省重点实验室，四川 内江 641100)

2019年6月，四川内江一土池养殖的黄颡鱼(已达上市规格)出现群体性死亡，死亡率20%～30%。濒死鱼出现离群、塘边游动、腹部膨大，部分鱼眼球出血、尾部和下颌部充血、出血等症状。经实验室细菌鉴定和人工感染实验，最后确定引起此次黄颡鱼发病的主要病原为杀鱼爱德华氏菌。

一、养殖条件

养殖场位于四川内江，养殖面积约180亩，其中30亩主养黄颡鱼，套养花白鲢。2019年初放入大规格鱼苗(购于眉山)，发病时已经达到上市规格，养殖量为1000～1500千克/亩。发病时水温(23±2)℃，简易试剂盒测得养殖水体水质指标如下：溶氧3.0～4.0毫克/升，pH7.0～8.2，亚硝酸盐0.45毫克/升，氨氮0.3毫克/升。

二、发病情况

2019年5月中旬开始发病，患病鱼食欲减退，离群在塘边游动，部分鱼悬浮于水中，受惊吓时反应迟缓；大体症状表现为腹部膨大，部分鱼眼球出血，鳃丝肿胀、出血，下颌和尾柄充血。发病初期每天死亡量50～100尾，高峰期达到300尾左右。发病后，使用聚维酮碘进行消毒，先后拌饲投喂多西环素等常用抗菌药物1周左右，效果不明显，仍有鱼死亡。

三、疾病诊断

1.解剖观察

将濒死黄颡鱼解剖，发现腹腔内有大量胶状淡黄色或血红色腹水，肝脏、肾脏和脾脏肿大、出血，并伴有少量出血点，肠道严重出血，胃部膨大，肠腔内充满气体或透明液体。

2.病原检测

寄生虫检测结果显示，在鳃部、肠道和体表未检测到寄生虫。提取病鱼的肝脏、肾脏和组织DNA进行疑似病毒核酸检测，斑点叉尾病毒(ChannelCatfishVirus，CCV)检测结果为阴性。无菌条件下，采集病鱼肝脏、肾脏和脾脏进行细菌接种，在实验室培养后分离到一株革兰氏阴性短杆菌。将优势菌株使用天根公司细菌DNA提取试剂盒提取基因组DNA，采用通用引物进行16S rRNA基因和gyrB基因PCR扩增，扩增产物送生工生物工程(上海)股份有限公司测序，通过NCBI比对和系统发育树分析，最后确定分离细菌为杀鱼爱德华氏菌。按照科赫法则，选用无病无伤健康黄颡鱼暂养1周，然后人工感染杀鱼爱德华氏菌，复制出与自然发病鱼相似的症状，最后确定引起此次疾病的病原为杀鱼爱德华氏菌。

3.病情分析

根据现场调查、水质检测和病原鉴定分析，推测引起此次黄颡鱼发病的原因包括以下几个方面：其一，养殖密度较高，底质较差，而黄颡鱼属于底栖鱼类，耐低氧能力一般。据养殖户介绍，2017－2019年，虽然每月均有换水，但从未使用过改底剂，池塘底部有大量残饵、粪便，导致底质恶化，黄颡鱼处于长期缺氧状态。其二，黄颡鱼冬季采食量偏少，体质也有所下降，初春开始逐渐增加投饵，由于胃肠道功能还没有完全恢复正常，大量摄食必然加重胃肠道负荷，导致胃肠道受损，引发肠炎；而且，大量高蛋白质食物在消化代谢过程中加重黄颡鱼肝肾负担，导致肝肾受损，最终使得水钠代谢失衡，出现腹水的症状。另外，因其所投饵料为浮性颗粒饲料，摄食鱼抢食剧烈，投喂点较为集中，黄颡鱼的坚硬鳍条可能导致互相划伤，而消毒又不及时，为疾病的暴发打开门户。其三，春末夏初，内江温度变化大，白天温度有时可高达30℃，多为晴热天气，夜间有时出现雷阵雨，冷热骤变对鱼体产生应激。加上长期投饵，水中积蓄的有机物的量超过池塘承载量，氨氮和亚硝酸盐的超标导致鱼体免疫力下降，引起疾病暴发。

四、疾病治疗

对分离出的杀鱼爱德华氏菌进行培养，通过纸片扩散法进行药敏实验，实验结果显示，分离菌株对氟苯尼考、环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星以及氧氟沙星敏感，对多西环素、链霉素、克拉霉素、卡那霉素及多粘菌素B中介，对其他抗生素均耐药。根据药敏结果制定以下治疗方案：按每千克鱼体重计算，恩诺沙星30毫克/千克(10%有效含量)、三黄粉0.5克/千克、板蓝根4克/千克、水产用多维5克/千克，拌饵投喂，连用5天；同时全池泼洒聚维酮碘消毒，保障充足溶氧。4天后黄颡鱼死亡量减少，5天后未出现死亡，1周后黄颡鱼腹水症状消失。

五、讨论与总结

杀鱼爱德华氏菌是2013年从迟缓爱德华氏菌中分离出的新亚种，还未见引起黄颡鱼发病的报道。据报道，鱼类感染迟缓爱德华氏菌后会引起败血症、烂身、内脏组织的坏死、肠炎、腹水等病症，最终导致养殖品种大规模死亡。此次黄颡鱼疾病暴发症状与迟缓爱德华氏菌引起的病症有相似之处，其危害性不亚于迟缓爱德华氏菌。养殖过程中存在着同病不同菌的现象，两者在治疗方案上不能同一而论，两者虽都为爱德华氏菌属，但其各自所具有的耐药性却可能不相同，养殖过程中应根据病原菌的特性选择其敏感的药物进行治疗。如多西环素在水产养殖中是常用抗生素，对大多数病原菌有杀灭作用，但此次分离的菌株对多西环素却为中介，达不到治疗目的，反而会造成耐药性。

水产动物发病往往是多因素造成的，此次黄颡鱼感染杀鱼爱德华氏菌暴发腹水症，其中高蛋白质饲料的大量投喂是主要诱因之一，水质恶化、温度不稳定等加剧了疾病发生的可能，另外没有定期杀灭水体里的有害病原，最终导致黄颡鱼腹水症的暴发。水产动物疾病重在预防，要每半个月进行1次消毒；平时养殖过程中，饲料应添加免疫增强剂，提高鱼体自身免疫力，从而降低病害发生率。本次黄颡鱼疾病的治疗方案中，采用恩诺沙星为主要治疗药物，辅以中药制剂和维生素，避免了单一用药的局限性。