日粮添加桑叶提取物对大鲵免疫性能的影响

刘超，张红，邱正，张瑞军

（1.山东省淡水渔业研究院，山东 济南 250013；2.山东省淡水水产遗传育种重点实验室，山东 济南 250117；3.济南市蔬菜技术推广服务中心，山东 济南 250100）

自2020年起，水产养殖饲料端进入“禁抗”时代，科技人员在积极寻找替代抗生素的有效产品，其中植物提取物被广泛关注和开发应用。桑科植物桑，又名家桑、荆桑、桑葚树、黄桑等，桑叶是桑的干燥叶，是家蚕的主要食物，我国各地广泛种植桑树，桑叶产量较高。桑叶具有疏散风热、清肺润燥、清肝明目等功效，并具有抗凝血、降血压、降血糖血脂、降胆固醇、抑菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗衰老等作用。目前，桑叶提取物因含有大量的多糖、生物碱、甾醇类等生物活性物质而被应用到畜牧养殖，但其很少作为水产养殖饲料添加剂[1]。

目前，大鲵人工养殖已初具规模，原生态、仿生态和工厂化等3种养殖模式日趋成熟，但有关大鲵人工配合饲料的研究较少[2-4]。Li等[5]研究表明，在大鲵日粮中添加桑叶提取物可以显著提高大鲵的采食量和胃肠道消化功能，改善肝脏抗氧化功能，增强机体的免疫力。现以大鲵为研究对象，分析桑叶提取物对其免疫力的影响，探讨最适添加剂量，为在大鲵养殖生产中科学、合理地利用桑叶提取物提供理论数据参考。

1 研究方法

1.1 试验材料

试验用桑叶提取物购于南京景竹生物科技有限公司，有效含量>60%；试验用鱼由陕西省汉中市南郑县南郑区黄官镇博瑞大鲵养殖家庭农场提供，其生长良好、无病和无伤。

1.2 试验设计及日粮

选取100尾健康状态良好，体质量为（45.20±0.25）g的大鲵，设置饲料中桑叶提取物质量分别为0、4、8和12 g/kg 4个试验处理组，其中未添加桑叶提取物组为对照组，每组5个重复，并按照单因素随机分组原则于每重复放养大鲵5尾，试验周期10周。对照组基础日粮原料组成和营养成分含量见表1。

1.3 饲养管理

试验用大鲵先停食静养2 d，后用基础日粮饲养7 d，再进行投喂试验。试验期间，大鲵饲养在75 cm×55 cm×20 cm的养殖箱中，注意避光。每日早晨定时清除箱内粪便，每日换水量为总水量的1/3。每日09：00投喂1次。饲养期间水温20~23℃，pH值为6.5~7.5，水中 ρ（溶解氧）>6.2 mg/L。

表1 基础日粮原料组成和营养成分

1.4 指标测定

检测的大鲵免疫指标主要包括：血清溶菌酶、补体C3、补体C4、免疫球蛋白M、免疫球蛋白A和免疫球蛋白G。测定用试剂盒购自南京建成生物工程研究所，并严格按照试剂盒说明书进行测定。

1.5 数据处理

试验数据经Excel 2010进行初步整理后，采用SPSS 24.0进行单因素方差分析，并用Duncan’s法对组间数据进行多重比较，以P<0.05作为显著性判断标准，实验数据以平均数和标准误表示。

2 结果与分析

饲喂不同剂量桑叶提取物后大鲵的免疫性能指标情况见表2。由表2可知，不同剂量的桑叶提取物显著提高了大鲵的免疫性能。其中8 g/kg桑叶提取物处理组大鲵的补体C4含量较对照组显著提高28.32%（P<0.05），其余处理组C4含量亦有所提高，但与对照组无显著差异（P>0.05）；8 g/kg桑叶提取物处理组大鲵的免疫球蛋白M含量比对照组显著提高53.50%（P<0.05），其余处理组免疫球蛋白M含量也有所提高，但与对照组和8 g/kg处理组均无显著差异（P>0.05）；8 g/kg桑叶提取物处理组大鲵的免疫球蛋白G含量比对照组、4 g/kg桑叶提取物组、12 g/kg桑叶提取物组分别提高26.55%、19.79%和17.97%，差异均显著（P<0.05），而后三者间无显著差异（P>0.05）。添加不同剂量桑叶提取物对大鲵补体C3、免疫球蛋白A含量及溶菌酶活性均无显著影响（P>0.05）。以上结果表明，在日粮中添加一定剂量的桑叶提取物可提高大鲵的免疫力，且最适添加量为8 g/kg。

表2 不同剂量桑叶提取物对大鲵免疫性能的影响①

3 讨论

动物的免疫球蛋白含量直接反映机体免疫功能的强弱，而补体和溶菌酶则是机体内非特异性免疫蛋白。免疫球蛋白、补体、溶菌酶对于鱼类抵御外源微生物的入侵具有重要作用，其含量和活性越高代表机体的免疫功能越强[6]。该研究表明，8 g/kg桑叶提取物处理组大鲵的补体C4含量较对照组显著提高28.32%（P<0.05）；8 g/kg桑叶提取物处理组大鲵的免疫球蛋白M含量比对照组显著提高53.50%（P<0.05）；8 g/kg桑叶提取物组的免疫球蛋白G含量比对照组、4 g/kg桑叶提取物组、12 g/kg桑叶提取物组分别显著提高26.55%、19.79%和17.97%（P<0.05）。由此可见，在大鲵日粮中添加一定剂量的桑叶提取物具有提高免疫力的功能，且最适添加量为8 g/kg。卢桦等[7]就桑叶提取物和1-脱氧野尻霉素对大鲵生长性能、肝脏功能及免疫能力的影响研究发现，桑叶提取物显著提高了大鲵的免疫球蛋白M含量，与该研究结果基本一致。桑叶提取物对大鲵免疫力的提升功能，可能是由于其含有丰富的糖类、生物碱、植物甾醇类等生物活性物质，而其中的活性物质具有抗菌、抗炎的功能，进而提高了大鲵的免疫能力。

4 结论

在该试验条件下，日粮中添加桑叶提取物可以显著提高大鲵的补体C4、免疫球蛋白M和免疫球蛋白G含量，且最适添加量为8 g/kg。