一例南美白对虾放苗后大量死亡原因的调查及分析

姜路辛，施礼科，陈 喆，陆晓明，孙海涛，陈 凡，郭水荣

(1.杭州市农业技术推广中心，浙江 杭州 310017；2.嘉兴华才检测技术有限公司，浙江 嘉兴 314500)

南美白对虾是我国重要的虾类养殖品种，在养殖过程中，放苗前后的相关环节至关重要。2021年3月中旬，浙江某养殖场在放养南美白对虾苗种后出现大量死亡，为明确死亡原因，笔者进行了实地取样调查。现将有关情况总结如下。

一、基本情况

养殖场位于杭州湾围垦区域，上一年度养殖池发生了白对虾“长不大”的情况，经原因调查，为肠胞虫病害。为杀灭底泥中的肠胞虫，养殖户在清塘时使用了敌百虫，7天后进水放苗，随后出现了虾苗大量死亡情况。以同一河道为水源的白对虾周边养殖场未出现类似情况，故排除外源水污染的可能性，将主要原因判定为场内因素。由于未能采集到存活的白对虾苗，未对常规病原进行检测，考虑到甲壳动物对敌百虫敏感，重点对水中残存的敌百虫和其在碱性条件下易转化成的敌敌畏进行了检测分析。

二、实验室分析结果

1.池塘水中敌百虫含量检测

取养殖池塘水20.12 克于50 毫升离心管中，加入40毫升乙腈，匀浆提取1分钟，再加入5克氯化钠，3 800 转/分离心5 分钟，取上清液20 毫升40℃旋蒸至1 毫升，过氨基固相萃取柱，收集液40℃旋蒸至近干，加入1 毫升乙腈＋水(3＋2)混匀，过0.22 微米滤膜，在液相色谱—串联质谱仪中检测，未检出敌百虫，检测结果见表1。

2.池塘水中敌敌畏含量检测

取养殖池塘水25.30 克于50 毫升离心管中，加入40 毫升乙腈、4 克硫酸镁、1 克氯化钠、1 克柠檬酸钠、0.5 克柠檬酸氢二钠及1 颗陶瓷均质子，盖上离心管盖，剧烈振荡1分钟后4 200转/分离心5 分钟，吸取6 毫升上清液加到内含900 毫克PSA 的15 毫升离心管中；4 200 转/分离心5 分钟，准确吸取1 毫升上清液于10 毫升试管中，40℃水浴中氮气吹至近干；加入20 微升内标溶液，加入1毫升乙酸乙酯复溶，过微孔滤膜，进行气相色谱—质谱测定，结果显示池水中敌敌畏的含量达到60微克/千克，测定结果见表1。

表1 池水中敌百虫、敌敌畏含量检测结果

三、分析和讨论

敌敌畏对南美白对虾幼虾的毒性较敌百虫更强，根据文献报道，其半致死浓度为0.22×10-7毫克/千克，本案例中池水敌敌畏浓度达到60 微克/千克，故初步判定本次白对虾苗种死亡是由敌敌畏中毒造成。

根据文献报道，敌百虫对池内的蟹类、桡足类和白对虾等具有较强的杀灭力，因此敌百虫常用作清池药物以预防虾类病害。但敌百虫在弱碱性条件下可形成毒性更大的敌敌畏，该过程随碱性的增强和温度的升高而加速，当pH 为8～10 时，敌百虫转变成敌敌畏仅需半小时。考虑到杭州湾围垦区域土壤普遍呈碱性，清塘时使用敌百虫，相当于作用于碱性土壤的浸出液，加速了敌百虫的转化。敌敌畏在30℃的环境中，18 天水解50%，所以本案例中养殖户在使用敌百虫7 天后进水放苗，显然是在敌敌畏没有完全降解的情况下进行的。虽然笔者对该池底部土壤的肠胞虫检测结果显示呈阴性，但仍不建议在碱性土壤的白对虾池清塘时使用敌百虫。

肠胞虫对世界各地的对虾养殖均造成了不同程度的损害，是目前危害南美白对虾的主要病害。2021年2月，笔者对杭州南美白对虾主养区的池塘底泥进行了抽样检测，在41批次样品中，3批次的池塘底泥呈现肠胞虫阳性；进一步跟踪了解，发现阳性池塘前期均使用了漂白粉消毒，而使用生石灰消毒的池塘未检测到阳性。根据该检测结果，在杀灭底泥中的肠胞虫时，笔者初步认为生石灰的作用优于漂白粉，建议采用生石灰作为防控肠胞虫的清塘手段。